在进行WB实验时，最令人头疼的就是遇到“鼻涕状”样品。这类样品的粘稠度使得吸收困难、结果不准确、无法添加到实验中、无法正常分离，并且条带效果差。实际上，这种粘稠物质是由基因组DNA缠绕蛋白所形成的“核酸残团”。它会带来密集的五大困扰：首先，移液器会被堵塞；其次，粘稠样品使得上清液无法分离；第三，尽管添加了loading buffer进行处理，样品仍然无法顺利加入到胶孔中；第四，条带在SDS-PAGE过程中会出现严重的拖尾和扭曲；最后，粘稠物质会包裹住蛋白质，导致其无法释放，最终在WB中显示出条带消失或信号微弱。

当裂解液加入样品后，细胞被裂解，基因组DNA双链结构解链，超长DNA链像“章鱼触手”缠住蛋白质、脂滴和细胞碎片，形成粘稠状态的“核酸残团”。这种核酸残团不仅令样品变得粘稠，还会将大量蛋白质拖入深不可测的不可溶状态，致使实验结果失真。研究者Li的研究显示，小鼠脾脏和肝脏中提取的蛋白质的图谱存在明显差异。通过分析RIPA提取后的核酸残团，发现不可溶组分中仍有许多蛋白条带，这些条带分布在整个蛋白质图谱的范围内，且各样品的不可溶组分图谱各不相同。这种蛋白质流失会导致图谱中的变化，随机且不可预测，不能真实反映样品中蛋白质的表达。

因此，若想获得真实可靠的WB结果，必须在样品制备过程中去除这些粘稠的核酸残团。超声波处理能够有效破坏蛋白质复合物并切割染色质，从而改善样品的粘稠状态。然而，它也有若干缺陷，例如会产生大量气泡，影响后续实验的准确性；超声过程中产热也可能导致蛋白质变性；同时，还可能出现交叉污染和样品损耗等问题。另外，超声法难以实现完全的蛋白质与核酸分离效果。

针对这些难题，使用核酸酶可以降解样品中的核酸，改善其粘稠性，但由于核染色质的致密性，酶切效率较低，而裂解液中的SDS、盐和还原剂又会抑制酶的活性，使得最终效果微乎其微。

如今，采用新一代柱式蛋白提取工具成为了一种理想的选择。与传统的RIPA强裂解液法相比，柱式法在同一份小鼠脾脏组织的应用中，能够展现出更为理想的结果。在SDS-PAGE后的考染中，柱式法的样品表现出更为干净的胶孔和锐利的条带，即使是低丰度蛋白也能全部被检测到。

因此，样品的“鼻涕”状态并非绝望的标志，而是一个重要的提醒：千万不要将核酸残团视作背景噪音。通过使用柱式法，从根本上消除这一障碍，可以显著提高WB的成功率。同时，作为在生物医疗领域誉满天下的金年会金字招牌诚信至上，我们始终致力于提供高质量的实验解决方案，让每位研究者都能获得可靠的实验结果。