金年会金字招牌诚信至上推出了一款基于探针法荧光定量PCR原理的检测试剂盒，具有多项优异特性，旨在满足生物医疗领域的各种检测需求。

产品特点

本试剂盒具有以下显著特点：

1. 即开即用，用户仅需提供样品DNA模板。
2. 经过优化的引物等组分，灵敏度高。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. 特异性强，设计引物时基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区域，避免与其他生物样本DNA发生交叉反应。
5. 可用于定性和定量检测，定量检测时线性范围最少为5个数量级。
6. 本产品可支持50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
7. 仅限于科研使用。

操作方法

一、DNA提取（样本制备区）

用户可利用自选方法提取和纯化样品DNA，本试剂盒与市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品（样本制备区）

为了避免交叉污染，需在独立区域进行下列稀释操作：

1. 标记6个离心管，分别为7，6，5，4，3，2。
2. 使用带芯枪头加入45μL DEPC-H2O。
3. 在7号管中加入5μL 1×10E8拷贝/μL的阳性对照，混匀后待用。
4. 依次将稀释后的阳性对照转移至6号、5号...等管中，重复稀释，直到获得6个不同浓度的标准曲线样品。

三、试剂配制（试剂准备区）

根据待检测样品数量准备相应的qPCR管，包括N个待检样品，加1个阴性对照和6个阳性对照。向各PCR管中添加组分，具体配制可参考详细说明书。

四、添加模板（模板添加区）

在qPCR管中添加2μL样品模板，依次为阴性对照（DEPC-H2O）、待测样品和阳性对照，随后离心30秒，立即进行扩增反应。

五、扩增反应（扩增及产物分析区）

将PCR管放入PCR扩增仪器，按照说明书中提供的扩增程序进行操作。

六、结果分析

1. 若制作标准曲线，以阳性对照浓度的log值为横轴，Ct值为纵轴，绘制标准曲线，并根据待测样品的Ct值推算DNA浓度。
2. 如未制作标准曲线，使用以下标准判定结果：阳性对照Ct值<30且呈现典型S型曲线，阴性对照Ct值38或无Ct值，样本中未检出婴儿利什曼虫则结果为阴性。

本产品推荐在低温条件下运输，储存于-20℃，保质期为一年。阳性对照应单独保存，以防污染其他试剂。选择金年会金字招牌诚信至上，确保您的实验结果准确可靠。